Страницы работы
Фрагмент текста работы
ЗАНЯТИЕ № 23 ТЕМА: АНАЭРОБНЫЕ БАКТЕРИИ
ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ
1. Клостридии. Классификация. Среда обитания. Факторы патогенности. Клостридии столбняка. Таксономия. Свойства. Столбнячный экзотоксин. Структура, фракции. Патогенез столбняка. Иммунитет. Пассивная и активная иммунопрофилактика. Методы установления иммунной прослойки. Иммунотерапия.
2. Клостридии анаэробной газовой инфекции. Таксономия. Свойства. Токсины. Патогенез заболевания. Препараты для иммунопрофилактики и серотерапии.
3. Клостридии диффициле и их роль в патологии человека.
4. Клостридии ботулизма. Таксономия. Свойства. Патогенез ботулизма. Токсин: серотипы, свойства (термо-, кислото- и ферментоустойчивость). Признаки отравления. Серотерапия.
5. Микробиологическая диагностика клостридиальных инфекций.
6. Аспорогенные анаэробы: бактероиды, порфиромонады, превотеллы, фузобактерии, лептотрихии, пептококки, пептострептококки; их роль в патологии человека. Принципы микробиологической диагностики болезней, вызываемых аспорогенными анаэробами.
При подготовке к занятию повторить тему "Методы культивирования анаэробов".
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГАЗОВОЙ ГАНГРЕНЫ
Газовая гангрена (греч. "разъедающая язва") – раневая инфекция, вызываяемая клостридиями сопровождающаяся некрозом (омертвением тканей), газообразованием, тяжелой интоксикацией, при отсутствии воспаления.
Клинические формы Газовая гангрена конечностей, сепсис, перитониты , пищевые отравления – интоксикации 95% C. Perfringens Чаще всего это наблюдается при боевых ранениях ("болезнь войн"), а в мирное время — при травмах, полученных в автомобильных и иных катастрофах, после оперативных вмешательств (особенно лапаротомии) и даже обычных инъекций, при кишечной непроходимости и пролежнях. В целом, это оправдывает определение газовой гангрены как "раневой инфекции". Преобладание C. perfringens объясняется несколькими причинами:
1) они чаще других клостридий представлены в почве и микрофлоре человека,
2) обладают одним из самых мощных некротизирующих токсинов — альфа-токсином,
3) относительно аэротолерантны, а потому менее требовательны к ишемизации тканей,
4) обладают капсулой, усиливающей инвазивность
Исследуемый материал: Раневое отделяемое, кровь, рвотные массы, промывные воды желудка, пищевые продукты
Мазок раневого содержимого
Окраска по Граму
Увеличение 100х10=1000 раз
Мазок чистой культуры
Окраска по Граму
Питательные среды и условия культивирования: плотные ( глюкозо –кровяной агар Цейслера, Вильсона – Блера среда), полужидкие Кита-Тароцци, Вильсона Блера, жидкие -Тиогликолевая среда (СКС)
Характер и скорость роста быстрый рост 8-12 часов с гемолизом и газообразованием
Морфолого-культуральные и биохимические свойства возбудителей анаэробной инфекции
ЗАНЯТИЕ № 23 ТЕМА: АНАЭРОБНЫЕ БАКТЕРИИ
ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ
Клостридии. Классификация. Среда обитания. Факторы патогенности. Клостридии столбняка. Таксономия. Свойства. Столбнячный экзотоксин. Структура, фракции. Патогенез столбняка. Иммунитет. Пассивная и активная иммунопрофилактика. Методы установления иммунной прослойки. Иммунотерапия.
Клостридии анаэробной газовой инфекции. Таксономия. Свойства. Токсины. Патогенез заболевания. Препараты для иммунопрофилактики и серотерапии.
Клостридии диффициле и их роль в патологии человека.
Клостридии ботулизма. Таксономия. Свойства. Патогенез ботулизма. Токсин: серотипы, свойства (термо-, кислото- и ферментоустойчивость). Признаки отравления. Серотерапия.
Микробиологическая диагностика клостридиальных инфекций.
Аспорогенные анаэробы: бактероиды, порфиромонады, превотеллы, фузобактерии, лептотрихии, пептококки, пептострептококки; их роль в патологии человека. Принципы микробиологической диагностики болезней, вызываемых аспорогенными анаэробами.
При подготовке к занятию повторить тему "Методы культивирования анаэробов".
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГАЗОВОЙ ГАНГРЕНЫ
Газовая гангрена (греч. "разъедающая язва") – раневая инфекция, вызываяемая клостридиями сопровождающаяся некрозом (омертвением тканей), газообразованием, тяжелой интоксикацией, при отсутствии воспаления.
Клинические формы Газовая гангрена конечностей, сепсис, перитониты , пищевые отравления – интоксикации 95% C. Perfringens Чаще всего это наблюдается при боевых ранениях ("болезнь войн"), а в мирное время — при травмах, полученных в автомобильных и иных катастрофах, после оперативных вмешательств (особенно лапаротомии) и даже обычных инъекций, при кишечной непроходимости и пролежнях. В целом, это оправдывает определение газовой гангрены как "раневой инфекции". Преобладание C. perfringens объясняется несколькими причинами:
1) они чаще других клостридий представлены в почве и микрофлоре человека,
2) обладают одним из самых мощных некротизирующих токсинов — альфа-токсином,
3) относительно аэротолерантны, а потому менее требовательны к ишемизации тканей,
4) обладают капсулой, усиливающей инвазивность
Исследуемый материал: Раневое отделяемое, кровь, рвотные массы, промывные воды желудка, пищевые продукты
Мазок чистой культуры
Окраска по Граму
Питательные среды и условия культивирования: плотные ( глюкозо –кровяной агар Цейслера, Вильсона – Блера среда), полужидкие Кита-Тароцци, Вильсона Блера, жидкие -Тиогликолевая среда (СКС)
Характер и скорость роста быстрый рост 8-12 часов с гемолизом и газообразованием
Морфолого-культуральные и биохимические свойства возбудителей анаэробной инфекции
Биологические свойства. Патогенные анаэробы относятся к отделу Firmicutes, семейству ВасШасеае и роду Clostridium. В настоящее время насчитывается 61 вид рода Clostriodium, из них 12 патогенные. Среди них С. botulinum, С. tetani, С. chauvoei, С. perfrindens, С. septicum, С. his- tolyticum, С. novyi, С. sordellii. Патогенные анаэробы вызывают инфекционные болезни, токсикозы, дисбактериозы. Некоторые виды клос- тридий вызывают несколько нозаформ, некоторые болезни являются результатом заражения некоторыми возбудителями. Отдельные ученые считают их хищными бактериями, так как их токсины приводят жертву к гибели, затем возбудитель, питаясь трупом, увеличивает численность своей популяции.
Клостридии, в том числе патогенные, — естественные обитатели почвы и водоемов, способные к сапрофитическому существованию. Некоторые виды (С. perfrindens) постоянно обитают в желудочно-кишечном тракте животных (чаще жвачных, свиней), но не всегда вызывают заболевания (у овец — при поедании ядовитых трав, у собак — при одностороннем кормлении мясом).
Морфология. Клостридии грамположительные, крупные (диаметр — 300,8 мкм, длина — до 10 мкм), полиморфные, подвижные перитри- хи. Они образуют споры, плострикапсулу не образуют (кроме С. peri- rendens (в организме)). Культивируются на средах с добавлением белкового гидролизата, мышц, печени в анаэробных условиях (среды Китта—Тароцци, глюкозокровяной агар, бульон Хоттингера, агар Цейслера и др.). Они не обладают ферментом каталазой и синтезируют высокоактивные токсины с гемолитическими, некротическими, нейротоксическими, летальным компонентами. Ряд ферментов у клос- тридий также обладает патогенным действием (поллегеноза, гиалу- ронидазаи др.).
Клостридии обладают также комплексными токсинами, состоящими из ряда компонентов: альфа-, 2бета-, гамма-, дельта-, эпсилон-, каппа-, тетта-токсинов. У С. perfrindens обнаружено 15 токсических веществ.
Биохимические свойства у клостридий оценивают по сбраживанию моносахаридов, многоатомных спиртов, степени расщепления белков (табл. 14.1).
По биохимическим свойствам клостридин делят на три группы:
- 1) с высокими сахаролитическими свойствами;
- 2) с высокой протеолитической способностью;
- 3) с умеренными сахаролитической и протеолитической активностью.
Патогенные клостридии вызывают болезни, называемые клост- ридиозами: эмфизематозный карбункул, столбняк, ботулизм, злокачественный отек, брадзот овец, анаэробную дизентерию ягнят, инфекционную энтеротоксемию овец, энтеротоксимию крупного рогатого скота, энтеротоксемию собак.
Антигенная структура. Клостридии обладают О- и Н-антигенами. Каждый вид имеет несколько сероваров. Термостабильные н-анти- гены определяют типовую принадлежность возбудителей.
Патогенность. К возбудителю столбняка восприимчивы все виды сельскохозяйственных животных; болеют также собаки, кошки, дикие млекопитающие, куры, гуси, индюки. Восприимчив и человек. Из лабораторных животных наиболее восприимчивы к нему белые мыши. К ботулизму восприимчивы лошади, крупный рогатый скот, овцы и козы. Свиньи, собаки, кошки, хищники — более резистентны. Высокой чувствительностью обладают норки. К возбудителю ботулизма восприимчивы более 36 видов птиц: куры, индюки, утки, гуси и др. Болеет человек. Белые мыши, морские свинки, кролики восприимчивы.
В естественных условиях эмфизематозным карбункулом болеет крупный рогатый скот в возрасте от 3 мес до 4 лет — наиболее восприимчив.
Злокачественный отек поражает животных и человека.
Ботулизм — кормовая токсико-инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением центральной нервной системы и парезами двигательной мускулатуры, прежде всего глотки, языка и нижней челюсти.
Возбудитель ботулизма — С. botulinum.
Общая характеристика основных видов патогенных анаэробов
Форма колоний на кровяном пластинчатом агаре
Рост в желатине
- 1) нежный кружевной рост в виде мелких пучков;
- 2) гладкие прозрачные колонии в виде росинок
Круглые сочные колонии, вначале сероватые, затем оливковые и зеленые с зоной гемолиза
Студенисто- серозный отек
Шероховатые (серые), выпуклые в центре, с изрезанными краями, с зоной гемолиза, отростки колоний двухконтурные
Нежные кружевные извитые нити, завитки с зоной гемолиза
Мелкие, гладкие, похожие на росинки, без гемолиза
Полная пеп- тонизация
Круглые, неправильной формы с зоной гемолиза
Токсигенпость. Ботулизм у животных возникает в результате поступления в желудочно-кишечный тракт с кормом токсина С. botulinum.
Токсины С. botulinum состоят из нескольких токсических факторов: нейротоксина, гемолизина, липазы и протеазы. Из них основным токсином для всех типов возбудителя, который имеет решающее значение в интоксикации организма, является нейротоксин. Протеолитические ферменты желудочно-кишечного тракта не разрушают токсины типа А, В, С, F, G и усиливают активность токсина типа Е. Усиление токсина типа Е под действием протеолитических ферментов объясняется тем, что он в основном вырабатывается микробной клеткой в виде протоксина.
Все шесть серологических типов экзотоксина обладают иммунологической специфичностью, выявляемой в реакции нейтрализации. Специфичность токсинов типов А, В и Е очень высока, С и D несколько ограничена. Токсины этих двух типов не нейтрализуются антитоксинами А, В и Е, но небольшие дозы токсинов С и D перекрестно нейтрализуются большими количествами антитоксинов D и С. Известен также факт перекрестной нейтрализации специфическими антисыворотками ботулинических токсинов типов Е и F.
В пределах типов А и В в реакциях агглютинации, преципитации и связывания комплемента по антигенам бактериальных клеток выявлены отдельные серологические группы; у типа Е обнаружено три серологические группы, у типов С, D F такого разделения не установлено.
Иммунитет. Иммунитет при ботулизме антитоксический, однако гуморальные факторы у разных видов животных не всегда соответствуют их устойчивости к токсинам, особенно к токсину типа Е. Высказывается предположение, что естественная резистентность животных к ботулиническому токсину генетически обусловлена и связана с особенностями протоплазматических элементов клеток.
У переболевших ботулизмом людей и животных невосприимчивость к повторному заболеванию не возникает, перенесенное заболевание не оставляет антитоксического иммунитета. Однако при вакцинации анатоксином или анакультурой животные приобретают типоспецифическую невосприимчивость к болезни, которая является результатом накопления в крови и тканях организма соответствующих антитоксинов.
Патогенез. Ботулинический токсин передается животным не только через корма, но и через воду. Водный путь передачи ботулиничес- кого токсина характерен для птиц. Известны многочисленные случаи массового заболевания и гибели водоплавающих птиц в природных условиях во всех частях света от ботулинического токсина типа С, который образуется в стоячей воде, где имеются гниющие растительные остатки или трупы павших животных.
При наличии соответствующих условий анаэробиоза, влажности и тепла CI. botulinum активно размножается в органических субстратах с продукцией токсина. Отравление животных возникает вследствие попадания с кормом или водой в пищеварительный тракт образовавшегося во внешней среде токсина или он продуцируется в желудочно- кишечном тракте инфицированного животного. В последнем случае очень важным является поступление в организм вместе с возбудителем небольших доз токсина, которые ослабляют защитные приспособления организма.
В патогенезе ботулизма большое значение имеет феномен Беринга, который заключается в многократном повышении чувствительности животных к повторному поступлению в организм ботулини- ческого токсина в небольших дозах. При этом животные погибают от небольших доз токсина.
Попавший в желудочно-кишечный тракт токсин при кислой реакции среды сохраняется в его верхних отделах 18—20 ч, не снижая своей активности. Из пищеварительного тракта он поступает в кровь, где его обнаруживают на второй—третий день и позже после проявления болезни, что указывает на его образование в организме. Циркуляция токсина в крови длится 24—48 ч. При этом поражается эндотелий капилляров и токсин проникает в клетки организма, прежде всего вызывая повреждение моторных центров передних рогов спинного и продолговатого мозга, что является причиной развития паралитического синдрома.
Клинические признаки. Инкубационный период при ботулизме длится от нескольких часов до 2—3 недель и зависит от первоначальной дозы токсина, поступившего в организм с кормом, и сопротивляемости организма, но обычно он составляет 12—48 ч. Чем больше токсина имелось в корме, тем короче инкубационный период и острее течение болезни.
Характерными признаками заболевания всех видов животных ботулизмом являются прогрессирующая слабость, нарушение иннервации мышечной системы, особенно бульбарной (относящейся к продолговатому мозгу), паралич жевательного и глотательного аппарата. Аппетит и жажда у больных сохраняются. Животные захватывают корм, долго его пережевывают, но проглотить не могут. Пытаются пить, но вода выливается из ротовой полости и через носовые ходы. Нередко отмечается паралич языка и нижней челюсти, Животные быстро худеют. Наблюдаются расстройство зрения, слюнотечение, нарушение секреторной и моторной функций желудочно-кишечного тракта. Температура тела больных животных обычно нормальная или субнормальная. При остром течении болезни летальность достигает 90%.
В зависимости от вида животных и количества токсина, попавшего в организм животного, болезнь протекает молниеносно, остро или хронически. Молниеносное течение болезни чаще отмечается у лошадей — животное погибает в течение нескольких часов. Больное животное лежит на боку, делает попытки встать, поднимает голову, но опять валится на бок и погибает. Иногда совершенно здоровых с вечера животных утром находят мертвыми. Диагностировать молниеносную форму болезни очень трудно ввиду отсутствия ее характерных признаков. Синдром бульварного паралича при этой форме болезни наблюдается редко.
Острое течение болезни длится у лошадей 2—3 сут. При этом наиболее четко выражен симптомокомплекс болезни, особенно паралич языка, который торчит изо рта или свободно висит при опущенной парализованной нижней челюсти. Хроническое течение болезни, которое нередко отмечается у лошадей, длится 10 сут и более и характеризуется параличом языка и глотки. Основные признаки болезни — затрудненность движений и неуверенность походки.
При хроническом течении болезни животные постепенно выздоравливают.
У крупного рогатого скота болезнь чаще протекает в острой форме и длится до 3—6 сут. У больных отмечают одышку, общую мышечную слабость, паралич задних конечностей, языка, глотки, гортани, слюнотечение, затруднение жвачки, зловонную отрыжку. Надои резко сокращаются или совсем прекращаются. При хроническом течении болезни нередко поражаются легкие. У крупного рогатого скота иногда отмечается самовыздоровление.
У пушных зверей наблюдают слюнотечение, паралич задних конечностей, языка, глотки, общее расслабление скелетной мускулатуры.
“>